有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留速测试剂盒使用说明书（酶抑制法）

1. 适用范围

本试剂盒适用于检测新鲜蔬菜中有机磷类和氨基甲酸酯类农药的残留量，确保食品安全与健康。

2. 检测依据

本试剂盒的使用方法依照国家标准GB/T5009199-2003《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》进行。

3. 试剂盒组成

• 显色剂：1瓶（100T）、2瓶（200T）、5瓶（500T）
• 底物：1瓶（100T）、2瓶（200T）、5瓶（500T）
• 胆碱酯酶：1瓶（100T）、2瓶（200T）、5瓶（500T）
• 缓冲试剂浓缩液：1瓶（各规格）
• 说明书：1份（各规格）

4. 溶液配制

4.1 缓冲溶液

将500mL纯净水中加入5mL的缓冲试剂浓缩液，混匀后可在室温下保存。

4.2 胆碱酯酶

该酶无需配制，使用时直接取100 μL，并在4℃下冷藏保存。

4.3 显色剂

使用时直接取100 μL，该显色剂亦不需配制，并需在4℃下冷藏。

4.4 底物

加入10 mL的纯净水溶解后，使用时直接取100 μL，并在4℃冷藏保存。

5. 样品提取

在选取有代表性的蔬菜样品时，需擦去表面泥土后进行采样。叶菜类可取不同植株的叶尖部分，果菜类则应从不同个体的表皮取样。具体操作为：

• 叶菜：取2克大小为1cm见方的叶尖样品置于样品杯。
• 果蔬：取3克大小为1cm见方的表皮样品置于样品杯。

加入10 mL缓冲液，震荡1-2分钟，待用提取液静置2分钟后进行检测。

6. 操作步骤

6.1 对照测试

在清洁的试管中，加入25 mL缓冲液、100 μL显色剂及100 μL胆碱酯酶，混匀后在37℃下恒温10分钟，最后加入100 μL底物，摇匀后立即倒入比色皿，进行对照测试。

6.2 样品测试

另一干净试管内加入25 mL样品提取液、100 μL显色剂及100 μL胆碱酯酶，混匀后在37℃恒温10分钟，再加入100 μL底物，迅速倒入比色皿，使用农残检测仪进行样品测试。仪器将显示抑制率。

7. 结果判定

使用分光光度计于412nm处测试吸光度值的变化，依据公式计算抑制率： 抑制率（%）=[(△A0-△At)/△A0]×100% 检测仪结果显示抑制率超过50%时为阳性，表明样品中存在高浓度有机磷或氨基甲酸酯类农药。阳性结果需重复检测两次以上，如有必要，使用其他方法确认具体农药种类和含量。

8. 注意事项

• 8.1 酶活性要求：本试剂盒中酶的正常活性应≥△A0 0.3，符合国标要求。
• 8.2 使用：任何试剂应遵循“使用一瓶配制一瓶”的原则，使用前请摇匀，使用后应更换新试剂以避免变质。
• 8.3 防止交叉污染：一旦从试剂瓶中吸出试剂，禁止再次放回，以免造成交叉污染。
• 8.4 对于色素干扰严重的过滤液，可用活性碳脱色处理，过滤或离心后取清液进行样品提取。

9. 贮存条件与有效期

本试剂盒应在4℃冰箱中保存，有效期为12个月，常温下仅可保存3个月。使用Z6·尊龙凯时品牌产品，确保您检测的准确性与可靠性。